Jak rekonstytuować liofilizowane peptydy: przewodnik laboratoryjny

Liofilizowane peptydy dostarczane są w postaci lekkiego proszku w zamkniętych vialach. Zanim będzie można je zastosować w hodowli komórkowej, testach wiązania lub innych modelach in vitro, należy je rozpuścić w odpowiednim rozcieńczalniku. Staranna praca pozwala zachować integralność peptydu i sprawia, że​późniejsze pomiary są bardziej wiarygodne.

Zanim zaczniesz

• Jeśli vial była przechowywana w lodówce lub zamrożona, należy poczekać, aż osiągnie temperaturę pokojową.
• Sprawdź liofilizowany placek pod kątem przedostania się wilgoci lub uszkodzenia uszczelki.
• Przygotuj wodę bakteriostatyczną (0,9% alkohol benzylowy) lub wodę sterylną zgodnie z wymaganiami SOP.
• Należy używać strzykawek insulinowych lub precyzyjnych pipet skalibrowanych do małych objętości.
• Pracuj w czystym miejscu; rękawice i powierzchnie o niskiej zawartości cząstek zmniejszają ryzyko zanieczyszczenia.

Dodawanie rozcieńczalnika bez uszkadzania peptydu

Skieruj rozcieńczalnik powoli w dół wewnętrznej ścianki viala – nie na sam liofilizowany materiał. Strumienie o dużej prędkości mogą powodować pienienie i naprężenia mechaniczne matrycy peptydowej. Po dodaniu obliczonej objętości delikatnie zamieszaj lub zwiń vial. Unikaj energicznego wstrząsania, chyba że Twój protokół tego wyraźnie wymaga.

Obliczanie objętości

Końcowe stężenie zależy od ilości dodanego rozcieńczalnika w stosunku do masy peptydu w vialu. Vial 10 mg po rozpuszczeniu w 2 ml wody bakteriostatycznej daje 5 mg/ml. Skorzystaj z naszego Kalkulator rekonstytucji peptydów, aby przed rozpoczęciem zaplanować objętości pobierania i podziałki strzykawki.

Po rekonstytucji

• Pozwól, aby roztwór całkowicie się rozpuścił — większość peptydów klaruje się w ciągu kilku minut.
• Oznaczyć vial datą, stężeniem i numerem serii.
• Przechowywać zgodnie z danymi dotyczącymi stabilności specyficznego związku (często w temperaturze 2–8°C krótkoterminowo).
• Porcje, jeśli chcesz wielokrotnie zamrażać i rozmrażać; każdy cykl może zmniejszyć aktywność.

Tylko do badań. Postępuj zgodnie z instytucjonalnymi SOP i certyfikatem COA dostawcy w celu obsługi specyficznej dla związku.